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OD600细胞浓度仪检测原理

更新时间:2021-01-22      点击次数:6313

OD600 DiluPhotometer™分光光度计是一款小巧,易于操控的仪器,专门用于测量接近600 nm波长处的样品。它适用于包括大肠杆菌和酵母等多种细胞的生长速度的测量。OD600 DiluPhotometer™分光光度计搭配使用Implen’s DiluCell™ 10或DiluCell™ 20自动稀释比色皿方便测量样品量少的样品(各自仅需200 µl 和100 µl的样品量)。 DiluCell™ 10和DiluCell™ 20两个型号的比色皿可分别对样品进行10倍和20倍稀释。在带宽为40 nm的OD600上也可用Bradford法(595 nm)定量分析蛋白质。OD600 DiluPhotometer™分光光度计的小巧性和便携性使其便于在培养箱和厌氧条件下使用。

OD600 DiluPhotometer™经设计用于在波长600 nm附近进行分光光度分析,测定细菌和酵母生长率和蛋白质定量(例如Bradford法)。该仪器采用电池供电操作,可以方便地搬到培养室中,也可在厌氧条件下使用。充满电后电池可使用1个月。通过600nm LED光源与光纤结合,可进行光密度测量。如有液体洒出,可以很容易地从表面擦掉,可以用甲醛、环氧乙烷对样品槽区清洗消毒.

朗伯比尔定律

朗伯-比尔定律,也称为比尔定律,将光吸收与样品的属性关联在一起。这一定律表明,光通过特定样品时(T =I/ IO,I=透射光,IO =入射光),特定化合物的摩尔消光系数(ε)、材料中吸附物种的浓度(c)和光传播距离(d)之间存在对数关系 。当保持所有条件不变而只改变光程(光传播距离)时,可以通过比尔定律自动变化样品稀释度。OD600 DiluPhotometer™和DiluCell™结合使用,使得这一原则得以实现。 

自动样品稀释
以前必须使用体积至少为1ml的标准比色皿,而且需要额外手动操作稀释样品。采用Implen的DiluCell™时,所需样品量较低,且可以自动稀释样品。DiluCell™比色皿的*设计使光程从标准的10 mm降到0.5 mm(DC 20)或1.0 mm(DC 10)。根据朗伯-比尔定律,光程缩短可以将样品自动稀释20倍(DC 20)或10倍(DC 10)。DiluCell™自动稀释可以节省时间,并排除了稀释误差和交叉污染。

Bradford法蛋白质定量
Bradford法是一种快速而的总蛋白质浓度测定方法,通过将未知蛋白与考马斯亮蓝G-250染料结合来定量测定样品的蛋白质浓度。这种方法的定量依据是,在酸性溶液中与蛋白质结合后,考马斯亮蓝G250的大吸收从465nm迁移到595nm。将上述结合与其他不同的、已知浓度的标准蛋白与染料结合进行比较,从而计算未知蛋白的浓度。以牛血清白蛋白(BSA)标准曲线为例。



  

 

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