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高速离心机的几种分离技术方法的你都了解吗?

更新时间:2020-08-12      点击次数:807
       高速离心机的几种分离技术方法:
  A.差速离心:逐次增加离心力,每次可沉降样品溶液中的一些组份。
  差速离心是一种较常用的方法。在这种方法中,离心管在开始时装满了均一的样品溶液。通过在一定速度下一定时间的离心后,就可得到两个部份:沉淀和上清液。
  通常在离心时把大部分不需要的大粒子沉降去掉。这时所需的组份大部分仍留在上清液中。然后将收集到的上清液以更高速度离心,把所需的粒子沉积下来。离心的时间要选择得当,使大部份不需要的更小的粒子仍留在上清液中。对于得到的沉淀和上清液可以进行进一步的离心,直到达到所需要的分离纯度为止。差速离心的特点是操作简单,但分离纯度不高。
  B.密度梯度离心法:可以同时使样品中几个或全部组份分离,具有很好的分辨率。
  1)速率区带法:
  根据样品中不同粒子所具有的不同的尺寸大小及沉降速度(S)。大致步骤如下:
  在离心管中装入密度梯度溶液,溶液的密度从离心管顶部底部逐渐增加(正梯度)。
  将所需分离的样品小心地加密度梯度溶液的顶部。高速离心机属常规实验室用离心机,广泛用于生物,化学,医药等科研教育和生产部门 ,它利用转子高速旋转产生的强大离心力,分离液体与固体颗粒或液体混合物中各组分,适用于微量样品快速分离合成。样品在梯度溶液表面形成一负梯度。
  由于不同大小的粒子在离心力作用下,在梯度中移动的速度不一样,所以经过离心后会形成几条分开的样品区带。冷冻离心机就是利用离心力使得需要分离的不同物料得到加速分离的机器。冷冻离心机有分为低速、高速冷冻离心机,以及超速分析、制备两用冷冻离心机等多种型号。
  注意:样品粒子的密度大于梯度液注中任一点的密度。离心过程在区带到达管子底部前停止。
  2)等密度(单位:g/cm3或kg/m3)离心法:
  根据粒子的不同密度来分离。离心过程中,粒子会移与它本身密度相同的地方形成区带。
  密度样度的选择要使梯度的范围包括所有待分离粒子的密度。样品可以在密度梯度液粒上面或均匀分布在密度梯度中。经离心后,样品粒子达到它们的平衡点。
  注意:平衡后粒子的分离由其密度决定,与时间无关,此时再改变离心转速,只能改变区带的相对位置。
  2.密度梯度分析法
  梯度介质性质与选择:
  应具备的性质 :
  梯度物质的选择原则是满足分离方法的基本要求,一个理想的密度材料标准它应是:
  所形成的溶液密度应包括所需要的密度范围。
  具有某些性质,如折射率,据此可测定它的浓度。
  所形成的溶液粘度低。
  不损伤所分离的样品。
  离心分离后容易除去。
  不妨碍分离积分的分析。
 

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