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凯氏定氮仪测定医用胶原蛋白海绵中蛋白质含量

更新时间:2020-07-06      点击次数:863

前言

胶原蛋白海绵是以牛跟腱为原材料,通过酶解、纯化制取高纯Ι型胶原,再根据互贯网络技术制成。 胶原分子兼有修复、止血和填充三种作用,能够激活内源性凝血途径,在使用时通过压迫创面激活内源性凝血,以达到止血效果。

实验部分

 

1.1实验原理

      小麦中的有机态氮在浓硫酸和催化剂的共同作用下,转化为氨态氮。加碱蒸馏,使氨析出,用硼酸吸收后,再以盐酸或硫酸标准滴定液进行滴定。

1. 2 仪器与设备

K1160 全自动凯氏定氮仪

SH 420F 石墨消解仪

 

1. 3 试剂与耗材

 

实验中涉及到的试剂,均为优级纯或分析纯;实验用水为无氨蒸馏水。

1.3.1 盐酸或硫酸溶液:c(H + )= 0 . 1mol /L ,标准滴定液。

1. 3 . 2 硼酸溶液:质量分数 2% 。

1. 3. 3 氢氧化钠溶液:质量分数 40% 。

1. 3. 4 溴甲酚绿 - 甲基红混合指示剂:将溴甲

酚绿乙醇溶液 (1g/ L) 与甲基红乙醇溶液(1g/ L) 按 5 : 1 体积比临时混合摇匀备用。

1. 3 . 5 催化剂片: 3g 硫酸钾和 0. 2g 硫酸铜混合均匀压片

1. 4 实验过程

1 . 4 . 1 取样

将样品剪碎后,称量0.01g 的样品(至 0 . 1mg ),加硫酸钾 0.3g 与硫酸铜 0 .02g ,再沿瓶壁滴加硫酸2mL 。

1 . 4 .2 消解

利用石墨消解炉进行消解,将消化管放在石墨炉上,盖上排气罩,连接废气吸收系统,设定消解温度参数如下表:

消化完毕后,将消化管取下冷却。

1 . 4 . 3 上机测试

待消化管内溶液冷却至室温后,将消化管放置于定氮仪上,开始蒸馏滴定。定氮仪设置程序如下:

 

式中:M-标准酸摩尔浓度(mol/L)

 W-样品质量(g)

 V0-样滴定标准酸消耗量(mL)

 V-样品滴定标准酸消耗量(mL)

5.79-样品蛋白系数

结果与讨论

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